Ali Düşenkalkar, 1961 yılında Kıbrıs, Lefkoşa’da dünyaya geldi. Oyuncu Munis Düşenkalkar kız kardeşidir. İlkokul, ortaokul ve liseyi Lefkoşa’da tamamladı. Lise çağlarında Lefkoşa’da hem okulunda hem de bir gençlik derneğinde savaş karşıtı gösteriler yapan bir sokak tiyatrosunda rol aldı. 1979 yılında Devlet Konservatuarı’na tiyatro okumak için İstanbul’a gitti. 1983 yılında Mimar Sinan Üniversitesi Devlet Konservatuarı’ndan mezun oldu. Daha sonra İstanbul Devlet Tiyatrosu’nda göreve başladı.
Tiyatro oyunlarının yanı sıra; radyo tiyatrosu, radyoda arkası yarın, belgeseller ve sinema filmi ve dizi film seslendirmeleri de yapmaktadır. Uzun seneler Atatürk’ün Nutuk’unu saydam görüntü eşliğinde sivil toplum kuruluşlarına, askeri okullara, üniversitelere, lise son sınıflara yurt dışında Türk topluluklarına sunmaktadır.
Halen İstanbul Devlet Tiyatrosu'nda çalışmakta olan Ali Düşenkalkar, kurucuları Can Gürzap ve Arsen Gürzap olan Dialog Anlatım ve İletişimde Diksiyon, Fonetik, Drama, Konuşma dersleri vermektedir.
Eskişehir Anadolu Üniversitesi Konservatuarı Tiyatro Bölümü’nde Öğretim Görevlisidir.
Ali Düşenkalkar, evli ve bir çocuk babasıdır.